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对于刚接触科研的同学们★✿ღ✿,诡异结果图真的遍地开花★✿ღ✿!有的在培养皿里培养出乌龟★✿ღ✿、有的养出鬼脸★✿ღ✿,还有人跑 WB 能跑出山水画★✿ღ✿。相比之下科学新知★✿ღ✿,★✿ღ✿,科研老司机们的实验结果图真的非常丝滑★✿ღ✿,专治各种不服k8·凯发(中国)天生赢家·一触即发★✿ღ✿,★✿ღ✿!今天学霸君带大家盘点下 WB凯发k8国际首页登录★✿ღ✿。★✿ღ✿、PCR★✿ღ✿、细胞实验中的
WB 是实验室的第一道门槛★✿ღ✿,都说 WB 是玄学★✿ღ✿,充满未知★✿ღ✿,结果图千变万化★✿ღ✿,但是你见过山水画一般的 WB 结果图吗?胶不混匀★✿ღ✿,电压过大的下场就是这样~
还有部分科研小白 WB 转膜总是控制不住温度★✿ღ✿,拍照又加了过多的曝光液★✿ღ✿,结果曝光时不仅膜上脏乱差旧快破解版猫1.0.2★✿ღ✿!背景都能勾勒出一棵大树★✿ღ✿!
不过★✿ღ✿,到底什么样的结果才算好的实验结果啊?最近小红书一位科研大神发出漂亮的电泳图 ——loading 出方块的电泳★✿ღ✿,除了经验和运气也需要靠仪器设备的加持~
大神分析出了个人经验 —— 制胶时在涡旋仪上振一会★✿ღ✿,颠倒一下试管★✿ღ✿,然后再振★✿ღ✿,这样更能充分混匀★✿ღ✿;下层胶放久一些★✿ღ✿,放五十分钟★✿ღ✿;电压先 80V 30 min 再 100V 60 min 转膜的时候★✿ღ✿,切记 PVDF 膜在转膜液里可以放久一些★✿ღ✿,放四分钟哦~
如果 WB 是第一道门槛★✿ღ✿,PCR 就是进阶必备实验旧快破解版猫1.0.2★✿ღ✿,从蛋白表型过渡到分子机制★✿ღ✿,考验了一个科研人的稳定★✿ღ✿、耐力★✿ღ✿、敏捷度等全方面能力★✿ღ✿。qPCR 曲线经常乱成一团★✿ღ✿、RT-PCR 电泳图总是拖尾或者消失★✿ღ✿,结果图一言难尽★✿ღ✿。
照着说明书★✿ღ✿,坎坎坷坷地摸索★✿ღ✿,失败了 N 多次★✿ღ✿,也不知道失败原因在哪里★✿ღ✿,终于再一次对着说明书一字一句地理解★✿ღ✿,原来是 cDNA 浓度太高了★✿ღ✿。
PCR 结果跟诈骗一样★✿ღ✿,一样的引物凯发app官方网站★✿ღ✿、DNA★✿ღ✿、酶旧快破解版猫1.0.2★✿ღ✿、PCR 的程序★✿ღ✿、体系★✿ღ✿,结果差距这么大?★✿ღ✿!做了半年★✿ღ✿,感觉白做了★✿ღ✿,数据都不敢用了★✿ღ✿。
再来看一块顶级琼脂糖琼胶电泳结果★✿ღ✿,背景清晰不拖尾★✿ღ✿,120v 30 min 结合一点手稳与运气★✿ღ✿,即可收获完美凝胶图★✿ღ✿,及时更换 TAE 电泳液也是另一个小 tip 哦★✿ღ✿!
其实造成 qPCR 实验重复性差的原因主要是加样不准确★✿ღ✿。这种情况下★✿ღ✿,可以更换性能更好的移液枪凯发·K8国际-(中国)首页登录★✿ღ✿,★✿ღ✿,将模板做高倍稀释★✿ღ✿,以大体积加入反应体系★✿ღ✿,最后加样的时候可只用一档★✿ღ✿,也能提升结果图美观度★✿ღ✿。
看完 WB★✿ღ✿、PCR 就进入第三轮大 PK 了★✿ღ✿!培养皿是一个好地方★✿ღ✿,拥有合适的 PH★✿ღ✿、适宜的温度凯发app官方网站★✿ღ✿,以及各种养分★✿ღ✿,这会使结果的差异化变得更大★✿ღ✿。
除了能养出细胞系★✿ღ✿、原代细胞外★✿ღ✿,刚进入实验室的新手科研人★✿ღ✿,还可能会养出来各种细菌★✿ღ✿、乌龟凯发app官方网站★✿ღ✿、鬼脸.......
BSA:DMEM(1:9) +1% 的双抗凯发·k8(国际)-官方网站★✿ღ✿,结合合适的传代比例(刚复苏 1:2 传代★✿ღ✿,细胞状态好就换成 1:3/1:4★✿ღ✿,需要较多细胞的时候 1:5/6)★✿ღ✿。
据说用 PBS 漂洗爬片上的细胞 2 次★✿ღ✿,每次 3 min★✿ღ✿;加入 4% 多聚甲醛没过细胞★✿ღ✿,室温固定 20 min★✿ღ✿;后用 PBS 漂洗 3 次★✿ღ✿,每次 3 min★✿ღ✿;再加入 Triton X-100 没过细胞凯发app官方网站凯发app官方网站★✿ღ✿,室温通透 20 min★✿ღ✿,通透完成后旧快破解版猫1.0.2凯发app官方网站★✿ღ✿,PBS 漂洗 3 次★✿ღ✿,每次 3 min★✿ღ✿;加入山羊血清封闭 1 h旧快破解版猫1.0.2★✿ღ✿,封闭后不漂洗★✿ღ✿,依次孵育一抗二抗★✿ღ✿,漂亮结果就轻松拿到啦★✿ღ✿!
1★✿ღ✿、充分准备与规划★✿ღ✿:在实验开始前★✿ღ✿,彻底阅读并理解实验指南或规程凯发国际官网首页★✿ღ✿,★✿ღ✿,明确实验目的★✿ღ✿、步骤★✿ღ✿、所需材料及潜在风险★✿ღ✿;
制定详细的实验计划★✿ღ✿,包括所有预期的操作顺序★✿ღ✿;确保所有实验器材已校准并处于良好工作状态★✿ღ✿,试剂和溶液新鲜有效凯发app官方网站凯发app官方网站★✿ღ✿,标签清晰无误★✿ღ✿。
2★✿ღ✿、遵守安全规范与操作流程★✿ღ✿:实验过程中★✿ღ✿,不要随意离开正在进行的实验★✿ღ✿,时刻监控实验状态★✿ღ✿,及时调整或中断实验以防失控★✿ღ✿。
3旧快破解版猫1.0.2★✿ღ✿、细致观察与准确记录★✿ღ✿:实验中保持高度的警觉性和观察力★✿ღ✿,注意任何异常现象★✿ღ✿,如不寻常的颜色变化★✿ღ✿、气体释放★✿ღ✿、温度波动等★✿ღ✿。
最后★✿ღ✿,你有没有 get 过意外实验结果★✿ღ✿,他们都长什么样?欢迎分享你的实验结果图到【生物学霸后台】★✿ღ✿,有机会我们再拿出来跟大家分享哦★✿ღ✿!
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